CY5.5-OVA（CY5.5-labeled Ovalbumin）,CY5.5标记的卵清蛋白

结构特点

1. CY5.5（花菁染料5.5）
   • 光学特性：CY5.5是一种近红外荧光染料，激发波长约为675 nm，发射波长约为695-710 nm，处于近红外区域。
   • 光稳定性：CY5.5在生理条件下稳定，不易受到光漂白的影响，能够保持长时间的荧光信号。
   • 生物相容性：CY5.5是水溶性染料，易于与蛋白质结合，且通常不会显著影响蛋白质的功能或结构。
2. 卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）
   • 结构与性质：卵清蛋白是鸡蛋白中的主要成分，占蛋清蛋白总量的54%-69%，是一种典型的球蛋白，分子量约为44.5 kDa（也有说法为172.44 kDa，可能因测量方法或蛋白状态不同而异）。它含有多个反应性位点，如赖氨酸残基上的氨基，可以与CY5.5的活性基团（如NHS酯）进行共价连接。
   • 生物相容性：卵清蛋白具有良好的生物相容性和低免疫原性。
3. CY5.5-OVA复合物
   • 结合方式：CY5.5通过其NHS酯与卵清蛋白中赖氨酸残基的氨基反应，形成稳定的酰胺键，从而将CY5.5标记在卵清蛋白上。

合成方法

CY5.5标记卵清蛋白的过程通常包括以下几个步骤：

1. 将CY5.5-NHS酯溶解在少量无水有机溶剂（如DMSO或DMF）中，确保其在水溶液中不会快速水解。
2. 在缓冲溶液中（如pH 8.0左右的PBS缓冲液）加入适量的卵清蛋白溶液。
3. 缓慢加入CY5.5-NHS酯溶液到卵清蛋白溶液中，同时轻轻搅拌，以促进酯与蛋白质氨基的偶联反应。通常在室温或冰浴条件下反应1~2小时。
4. 调整pH值以保持在8.0附近，有助于提高酰胺键的形成效率。
5. 使用凝胶过滤或透析的方法去除未反应的CY5.5-NHS酯和其他小分子。
6. 纯化后得到的CY5.5标记卵清蛋白可以通过吸光度和荧光光谱测定标记效率。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体！
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